弧菌檢測培養(yǎng)基可采用121℃ 高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養(yǎng)基制備方法中,如無特殊規(guī)定,即可用此法滅菌。某些畏熱成分,如糖類,應另行配成20% 如或更高的濃液,以過濾或間歇滅菌法消毒,以后再用無菌操作技術、定量加于培養(yǎng)基。明膠培養(yǎng)基亦應用較低溫度滅菌。血液、體液和抗生素等則應從無菌操作技術抽取和加入于經(jīng)冷卻約50℃ 左右的培養(yǎng)基中。
在日常中有關弧菌檢測培養(yǎng)基常見問題有哪些?
1、能用肉眼判斷其pH值嗎?
答:酚紅的含量與普通培養(yǎng)基中的酚紅含量不同,不能通過肉眼觀察或通過經(jīng)驗來判定pH值,建議使用pH計進行測定。
2、緩沖系統(tǒng)是什么?
答:平衡鹽一般是由無機鹽及葡萄糖組成的。平衡鹽有Hanks′系統(tǒng)、Earle′s系統(tǒng)等。199系列培養(yǎng)基、MEM系列培養(yǎng)基均有Hanks′系統(tǒng)的培養(yǎng)基及Earle′s系統(tǒng)的培養(yǎng)基。但是有些培養(yǎng)基均不是以上常規(guī)的平衡鹽系統(tǒng),例如RPMI 1640培養(yǎng)基、F12培養(yǎng)基。清培養(yǎng)基的平衡鹽系統(tǒng)也不是常規(guī)的平衡鹽系統(tǒng),該平衡鹽系統(tǒng)的緩沖能力強于常規(guī)平衡鹽系統(tǒng)的緩沖能力。
5.、放置在冰箱中的培養(yǎng)基顏色會發(fā)生變化,為什么?
答:培養(yǎng)基保存于4℃冰箱中,培養(yǎng)基內CO2 會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。偏堿后再用于細胞培養(yǎng)將造成細胞生長停滯或死亡。偏堿時,可以通入無菌過濾的CO2,以調整pH值。