技術(shù)文章
Technical articles產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,McManus 在1946 年最先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來(lái)顯示糖原和其他多糖,該技術(shù)不僅能顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體、霉菌、真菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。過(guò)碘酸(又稱(chēng)高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑,它能氧化糖類(lèi)及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?,醛與Schiff 試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過(guò)氧化,這是很關(guān)鍵的步驟。
糖原PAS 染色液(真菌專(zhuān)用)利用真菌含有多糖,經(jīng)過(guò)碘酸氧化暴露出醛基,醛基與無(wú)色Schiff 結(jié)合呈現(xiàn)紅色。該染色法性能穩(wěn)定,特異性強(qiáng);操作簡(jiǎn)捷,僅需0.5h; 低濃度過(guò)碘酸更適用于真菌染色,無(wú)鹽酸乙醇分化液分化步驟。
產(chǎn)品組成:
自備材料:
1、蒸餾水
2、系列乙醇
操作步驟(僅供參考):
1、常規(guī)固定(常采用 10%中性福爾馬林), 常規(guī)脫水包埋。脫蠟至水。
2、入過(guò)碘酸溶液,室溫氧化 5~10min。
3、自來(lái)水沖洗 2 次,蒸餾水浸洗 2 次。
4、入 Schiff Reagent 并加蓋,置于室溫陰暗處浸染 10~20min。5、亞硫酸鈉溶液滴洗 2 次,每次 2min。
6、流水沖洗 2min。
7、Mayer 蘇木素復(fù)染核 2~5min。
8、流水沖洗 5min。
9、常規(guī)脫水透明,中性樹(shù)膠封固。
染色結(jié)果:
真菌 紫紅色
細(xì)胞核 藍(lán)色
備注:顏色深淺很大程度上取決于樣品在過(guò)碘酸溶液和Schiff Reagent 中作用時(shí)間的長(zhǎng)短。
陰性對(duì)照(可選):
1、取淀粉酶 1g 溶解于 PBS(pH5.3) 100ml,處理 30~60min,與其他樣本共同入過(guò)碘酸溶液。結(jié)果應(yīng)為陰性。
2、(備選方案)取唾液片(過(guò)濾后用)處理 30~60min,與其他樣本共同入過(guò)碘酸溶液。結(jié)果應(yīng)為陰性。
3、(備選方案)如果對(duì)照片采用其自身樣本,對(duì)照片不經(jīng)過(guò)碘酸溶液這一步,直接入 Schiff
Reagent。結(jié)果應(yīng)為陰性。
注意事項(xiàng):
1、過(guò)碘酸氧化時(shí)間不宜過(guò)久,氧化時(shí)的溫度以 18~22℃最佳。
2、過(guò)碘酸溶液、Schiff Reagent 使用時(shí)避免接觸過(guò)多的陽(yáng)光和空氣,使用前最好提前
30min 取出恢復(fù)至室溫,避光暗處使用。
3、過(guò)碘酸溶液和 Schiff Reagent 中作用時(shí)間非常重要,該依據(jù)切片厚薄、細(xì)胞或組織的類(lèi)別等決定。
4、如常規(guī)切片建議用糖原PAS 染色液(DG0005),其過(guò)碘酸和蘇木素濃度都相對(duì)高。
5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期: 12 個(gè)月有效。