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免疫和腫瘤胞測定及分選中的應(yīng)用

更新時(shí)間:2016-08-08點(diǎn)擊次數(shù):1137

免疫和腫瘤胞測定及分選中的應(yīng)用

   細(xì)胞分選是FCM技術(shù)一項(xiàng)特殊的功能,在免疫研究及臨床應(yīng)用上占有重要地位。它的主要作用一是分選,二是鑒定,而分選又必須同鑒定結(jié)合進(jìn)行。只要有相應(yīng)的熒光標(biāo)記,就可以分離出任何所需要的細(xì)胞群體,尤其是含量但對鑒定又非常主要的細(xì)胞,純度可達(dá)95%以上。

細(xì)胞周期中靜止期細(xì)胞的分離R.Schwarting等制備一株抗核抗原的單克隆抗體Ki-67,它同細(xì)胞周期中G1、S、G2M期 所有具增殖性的細(xì)胞結(jié)合,但不同G0期細(xì)胞反應(yīng),這樣就可以用分選技術(shù)把靜止期細(xì)胞分離出來。

人外周血嗜堿細(xì)胞的分離  IgE介導(dǎo)嗜堿細(xì)胞釋放組織胺和其他介質(zhì),是介導(dǎo)I型超敏反應(yīng)的特定標(biāo)志,但白細(xì)胞中的嗜堿細(xì)胞濃度極低,阻礙了這一研究。用抗鼠IgE單克隆抗體同F(xiàn)ITC結(jié)合物染色技術(shù),即可通過分選方法把嗜堿細(xì)胞分離出來,2小時(shí)可收集細(xì)胞4×105,活存88%以上。

外周血中變異紅細(xì)胞的鑒定  這是分選技術(shù)同顯微鏡結(jié)合的鑒定、監(jiān)測手段。它可成功地來定量在正常個(gè)體血細(xì)胞內(nèi)檢查出含突變的血紅蛋白的紅細(xì)胞,也可以監(jiān)督暴露于致突變原的環(huán)境工作人員含突變紅細(xì)胞個(gè)體的背景,檢出敏感性可達(dá)3×10-5細(xì)胞。

從母體循環(huán)中分離出胎兒細(xì)胞  其原理是用YDNA探針,HLA-A特異單克隆抗體,Rh因子血清等染色及胞/核比例,細(xì)胞大小,核大小及光散射等特點(diǎn)在母體中找出非母體細(xì)胞標(biāo)記,即可鑒定出胎兒細(xì)胞。這種技術(shù)的推廣應(yīng)用,可以減少母體懷孕期間羊膜穿刺或滋氧層穿刺帶來的危險(xiǎn)。

分選技術(shù)也存在著某些技術(shù)不足,如分離速度、產(chǎn)量受限;分選中由于管道、濾材等因素使得大細(xì)胞或有粘附性細(xì)胞受到限制性的選擇。目前,細(xì)胞標(biāo)記藥品及方法,也會不同程度影響細(xì)胞質(zhì)量。隨著新技術(shù)的應(yīng)用,這些問題會得到滿意地解決。

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